البيانات الاساسيه

السيره الذاتيه

نهير أحمد محمود

عنوان رسالة الماجستير

‎دراسات باثولوجية على استخدام الخلايا الجذعية الوسيطة المرتبطة بالاكسوسومات ضد سمية المواد متناهية الصغر في حيوانات التجارب

ملخص رسالة الماجستير

الملخص العربي تُعَدّ أنابيب الكربون النانوية (CNTs)، وبالأخص الأنابيب النانوية متعددة الجدران (MWCNTs)، من أكثر المواد المستخدمة في التطبيقات الطبية الحيوية نظرًا لخصائصها الفيزيائية–الكيميائية الفريدة. إلا أن قدرتها على عبور الحواجز الخلوية والتفاعل مع المكوّنات داخل الخلية تُسهم أيضًا في إحداث سمية ملحوظة، ترتبط أساسًا بالإجهاد التأكسدي والالتهاب والموت الخلوي المبرمج (apoptosis)، مما يؤدي إلى تلف الأعضاء بما في ذلك السمية العصبية. في المقابل، برزت الخلايا الجذعية الميزنكيمية\ الوسيطة (MSCs) ومشتقاتها من الإكسوسومات (MSC-Exos) كخيارات علاجية واعدة بفضل خصائصها المناعية المنظمة والمضادة للالتهاب والتجديدية، مما يجعلها بديلًا أكثر أمانًا وفاعلية لمواجهة السمية الناجمة عن المواد النانوية. تم استخدام 32 من ذكور الجرذان البيضاء (عمر 4 أسابيع، وزن ~110 جم) قُسِّمت إلى أربع مجموعات متساوية في كل مجموعة ٨ فئران. 1. المجموعة الأولى (ضابطة): حُقنت بمحلول ملحي (في الغشاء البريتوني. 2. المجموعة الثانية (MWCNT): حُقنت بجرعة (1 مجم/كجم من وزن الجسم، IP) خلال الأسبوعين الأول والثالث. 3. المجموعة الثالثة (MWCNT + MSCs + Exosomes): حُقنت بـ MWCNTs كما في المجموعة الثانية، بالإضافة إلى حقن أسبوعي بـ MSCs (2.5 × 10⁶ خلية/كجم من وزن الجسم، IP) وإكسوسومات (100 ميكروجرام بروتين/كجم من وزن الجسم، IP) خلال الأسابيع 2–4. 4. المجموعة الرابعة (MSCs + Exosomes): حُقنت فقط بـ MSCs والإكسوسومات دون تعرض لـ MWCNTs. بعد 30 يومًا، تم تجميع أنسجة الرئة والمخ لتحليلها. شملت التقييمات التجريبية مجموعة واسعة من الفحوصات النسيجية والجزيئية لتوضيح التأثيرات السمية لـ MWCNTs والتأثيرات العلاجية المحتملة للخلايا الجذعية وإكسوسوماتها. أُجريت الفحوصات النسيجية باستخدام صبغة الهيماتوكسيلين والإيوزين (H&E) لتقييم البنية العامة للأنسجة، وصبغة ماسون ثلاثية الألوان للكشف عن ترسيب الكولاجين والتليّف، وصبغة PAS للكشف عن المكوّنات المخاطية والتغيرات في الخلايا الكأسية. كما أُجريت اختبارات بيوكيميائية لتقدير حالة الإجهاد التأكسدي ومضادات الأكسدة، شملت قياس المالوندايالديهيد (MDA) كمؤشر لفرط بيروكسدة الدهون، ونشاط إنزيم سوبر أوكسيد ديسميوتاز (SOD)، ومستويات الجلوتاثيون (GSH)، والإجمالي الكلي للثيولات. أُجري تحليل التعبير الجيني لاستكشاف المسارات الالتهابية والتليّفية (TGF-β1، MMP-9، NF-κB في أنسجة الرئة)، بينما في أنسجة المخ تم فحص مسارات (MAPK، c-Myc، وإشارة الإنتجرين) لتوضيح آليات السمية العصبية والالتهاب العصبي. إضافة إلى ذلك، استُخدم التحليل المورفومتري الرقمي عبر برنامج ImageJ لتوفير قياسات كمية دقيقة لمساحات التليّف، وسمك الظهارة القصبية، وفرط تنسج الخلايا الكأسية، مما دعم النتائج النسيجية ببيانات كمية دقيقة. الرئة: أدى التعرض لـ MWCNTs إلى تغيرات مرضية واضحة في أنسجة الرئة، شملت زيادة سمك الظهارة القصبية، وفرط تنسج الخلايا الكأسية، وتليف واسع النطاق. ارتبطت هذه التغيرات النسيجية بزيادة ملحوظة في الإجهاد التأكسدي، ظهر ذلك في ارتفاع مستويات MDA، إلى جانب زيادة التعبير الجيني لعوامل الالتهاب والتليف مثل TGF-β1 وMMP-9 وNF-κB. في المقابل، أدى العلاج بـ MSCs والإكسوسومات المشتقة منها إلى تخفيف هذه التغيرات بشكل كبير، حيث انخفض التليف وإعادة تشكيل الظهارة، وتراجعت مستويات الإجهاد التأكسدي، واستُعيدت دفاعات مضادات الأكسدة (GSH، SOD)، مع خفض التعبير الجيني الالتهابي، مما يشير إلى تأثيرات وقائية وتجديدية قوية. المخ (الحصين والقشرة الدماغية): في الجهاز العصبي المركزي، تسبب التعرض لـ MWCNTs في ظهور تأثيرات سُمية عصبية بارزة، تجسدت في تكثف أنوية الخلايا العصبية (nuclear pyknosis)، ضمور الخلايا العصبية، وانخفاض الكثافة العصبية في مناطق الحُصين والقشرة الدماغية. رافقت هذه التغيرات البنيوية حالة من اختلال التوازن التأكسدي، تميزت بزيادة مستويات MDA وانخفاض نشاط SOD. وكشفت التحليلات الجزيئية عن زيادة في التعبير الجيني لمسارات MAPK وc-Myc مع ضعف إشارات الإنتجرين، مما يعكس تنشيط مسارات الإجهاد والموت الخلوي المبرمج التي تسهم في التنكس العصبي. على الجانب الآخر، أدى العلاج بـ MSCs والإكسوسومات إلى تخفيف كبير في التنكس العصبي، وتحسين حالة مضادات الأكسدة عبر استعادة التوازن التأكسدي، وخفض التعبير الجيني لـ MAPK وc-Myc، مع تعزيز مسارات الإنتجرين. تشير هذه النتائج مجتمعةً إلى الإمكانات الوقائية والعلاجية للخلايا الجذعية الميزنكيمية ومشتقاتها ضد السمية العصبية المستحدثة بالـ MWCNTs.

عنوان رسالة الدكتوراه

لا يوجد

ملخص رسالة الدكتوراه

لا يوجد